核酸內切酶酶聯免疫吸附測定（ELISA）說明書-PROGEN Endonuclease ELISA

更新時間：2025-09-24

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核酸內切酶水平的快速簡便定量

PROGEN 核酸內切酶 ELISA 試劑盒是一種高靈敏度檢測方法，專為體外檢測粘質沙雷氏菌（Serratia marcescens）來源的核酸內切酶（包括 DENARASE®）及含 DENARASE® 的樣品而設計。

該檢測方法可用于多種工藝來源的樣品，包括腺相關病毒（AAV）基因治療載體生產過程中的樣品。在 AAV 純化過程中，會添加核酸酶以降解多余的 DNA 雜質。然而，不受控的核酸酶活性可能會破壞關鍵成分（如 AAV 載體基因組和質粒 DNA），導致產量降低、純度下降，更重要的是可能影響最終基因治療產品的安全性和治療效果。因此，常規監測核酸內切酶水平對于保障產品完整性和維持治療效果至關重要。

檢測原理

該核酸內切酶 ELISA 試劑盒采用微孔板形式進行雙抗夾心 ELISA 檢測，具體流程如下：

微孔板的孔中包被有特異性單克隆捕獲抗體，用于捕獲樣品（如細胞裂解液或純化病毒制劑）中存在的粘質沙雷氏菌來源的核酸內切酶。捕獲的核酸內切酶通過兩步法進行檢測：

1.生物素偶聯的單克隆檢測抗體（抗體偶聯物）與固定化的核酸內切酶結合。

2.鏈霉親和素 - 過氧化物酶偶聯物（HRP 偶聯物）與生物素分子結合。

加入底物溶液（TMB，四甲基聯苯胺）后會發生顯色反應，顯色強度與孔中分析物（核酸內切酶）的濃度成正比。通過光度法在 450 nm 波長下（參比波長為 620–690 nm）測量吸光度。未知樣品中的核酸內切酶濃度可根據相應的 DENARASE® 標準曲線計算得出。

為何選擇本核酸內切酶 ELISA 試劑盒？

•即用型：提供預包被微孔板及所有必需試劑

•超高靈敏度檢測：由高特異性單克隆抗體實現，靈敏度高于競品試劑盒

•省時高效：檢測時間縮短約一半，總孵育時間約 2 小時

•寬動態范圍：32 pg/ml 至 1000 pg/ml（450 nm 波長處吸光度值）

• 檢測限（LOD）：4 pg/ml

•定量限（LOQ）：12 pg/ml

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